抗菌塑料檢測(cè)方法詳解:抗細(xì)菌檢測(cè)和抗霉菌檢測(cè)

258次 2024.08.20

    抗菌塑料具有抑制/殺死細(xì)菌和(或)抑制/殺死霉菌作用,按抗菌性能可分為三種類型:抗細(xì)菌型、抗霉菌型、抗細(xì)菌和霉菌型。抗菌塑料是一種新型的功能塑料,隨著人們對(duì)生活質(zhì)量要求的提高,其應(yīng)用日益廣泛。為保證國內(nèi)抗菌塑料制品的質(zhì)量,對(duì)抗菌塑料進(jìn)行檢測(cè)非常重要。




    作為第三方檢測(cè)中心,中科檢測(cè)機(jī)構(gòu)擁有CMA和CNAS認(rèn)證檢測(cè)資質(zhì),檢測(cè)設(shè)備齊全,數(shù)據(jù)科學(xué)可靠,可出具國家認(rèn)可的抗菌塑料檢測(cè)報(bào)告。


    抗菌塑料檢測(cè)項(xiàng)目和執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)


    1. 抗菌性能評(píng)價(jià):評(píng)估塑料材料對(duì)一定菌種的抗菌性能。常見的測(cè)試菌種有大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)可以是ISO 22196:2011《塑料和其他非金屬的抗菌性能評(píng)價(jià)》。


    2. 抗菌劑釋放性能檢測(cè):評(píng)估塑料材料中抗菌劑的釋放情況。可以使用吸附法、萃取法等方法進(jìn)行測(cè)定。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)可以是ISO 22196:2011《塑料和其他非金屬的抗菌性能評(píng)價(jià)》。


    3. 持續(xù)抗菌性能評(píng)價(jià):評(píng)估塑料材料對(duì)抗菌性能的持久性。可以通過周期性或連續(xù)性的浸泡、洗滌等實(shí)驗(yàn)來模擬材料在使用過程中的情況。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)可以是ISO 22196:2011《塑料和其他非金屬的抗菌性能評(píng)價(jià)》。


    4. 殺菌環(huán)境中的抗菌性評(píng)價(jià):評(píng)估塑料材料在抗菌環(huán)境中的抗菌性能。可以使用含有抗菌劑的培養(yǎng)基、含有抗菌劑的液體培養(yǎng)基等方法進(jìn)行文獻(xiàn)實(shí)驗(yàn)。執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)可以是ISO 22196:2011《塑料和其他非金屬的抗菌性能評(píng)價(jià)》。


    抗細(xì)菌檢測(cè)方法


    1、原理:


    本方法通過定量接種細(xì)菌于待檢樣品上,用貼膜的方法使細(xì)菌均勻接觸樣品,經(jīng)過一定時(shí)間的培養(yǎng)后,測(cè)得樣品中的活菌數(shù),并計(jì)算出樣品的抗細(xì)菌率。


    2、檢測(cè)步驟


    1)菌種保藏


    將菌種接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)斜面上,在(37±1)°C 下培養(yǎng) 24h 后,在0°C~5°C 下保藏(不得超過 1 個(gè)月),作為斜面保藏菌。


    2)菌種活化


    將斜面保藏菌轉(zhuǎn)接到平板營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上,在(37±1)°C 下培養(yǎng) 24h,每天轉(zhuǎn)接1 次,不超過 2 周。


    3) 菌懸液制備


    用接種環(huán)從 A.3.2 的培養(yǎng)基上取少量(刮 1~2 環(huán))新鮮細(xì)菌,加入培養(yǎng)液中,并依次做 10 倍遞增稀釋液。


    4)樣品試驗(yàn)


    分別取試驗(yàn)用菌液(A.3.3)0.2mL 滴加在陰性對(duì)照樣品(A)、空白對(duì)照樣品(B)和抗菌塑料樣品(C)上。每個(gè)樣品做 5 個(gè)平行。


    用滅菌鑷子夾起滅菌覆蓋膜分別覆蓋在樣品(A)、樣品(B)和樣品(C)上,一定要鋪平,使菌均勻接觸樣品,置于滅菌平皿中,在(37±1)°C、相對(duì)濕度大于 90%條件下培養(yǎng) 24h。取出培養(yǎng) 24h 的樣品,分別加入洗脫液(A.2.3.3.2) 20mL,反復(fù)洗樣品(A)、樣品(B)、樣品(C)及覆蓋膜(最好用鑷子夾起薄膜沖洗),充分搖勻后,取一定量接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA) 中,在(37±1)°C 下培養(yǎng) 24h~48h 后活菌計(jì)數(shù),按 GB/T 4789.2 的方法測(cè)定活菌數(shù)。


    以上試驗(yàn)重復(fù)兩次。


    抗霉菌檢測(cè)方法


    1、檢測(cè)原理:


    本方法用以測(cè)定抗菌塑料在霉菌生長(zhǎng)的條件下對(duì)霉菌的抑制作用。


    本方法規(guī)定將一定量的孢子懸液噴在待測(cè)樣品和培養(yǎng)基上,通過直接觀測(cè)長(zhǎng)霉程度來評(píng)


    價(jià)抗菌塑料的長(zhǎng)霉等級(jí)。


    2、檢測(cè)步驟:


    1)菌種保藏


    將菌種分別接種在馬鈴薯–葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA) (B.2.3.3)斜面上,在 28°C~30°C 下


    培養(yǎng) 7d~14d 后,在 5°C~10°C 下保藏(不得超過 4 個(gè)月),作為保藏菌。


    2)菌種活化


    將保藏菌接種在 PDA 斜面培養(yǎng)基試管中,培養(yǎng) 7d~14d,使生成大量孢子。未制備飽子懸液時(shí),不得拔去棉塞。每打開 1 支只供制備 1 次懸液,每次制備孢子懸液必須使用新培養(yǎng)的霉菌孢子。


    3)孢子懸液制備


    在培養(yǎng) 7d~14d 內(nèi) B.3.2 的 PDA 斜面培養(yǎng)基中加入少量無菌蒸餾水,用滅菌接種針輕輕刮取表面的新鮮霉菌孢子,將孢子懸液置于 250mL 錐形瓶?jī)?nèi),然后注入洗脫液40mL。


    錐形瓶中加入直徑 5mm 的玻璃珠 10 粒~15 粒與孢子混合,密封后置水浴振蕩器中不斷振蕩使成團(tuán)的孢子散開,然后用單層紗布棉過濾以除去菌絲。將其裝入滅菌離心管中,用離心機(jī)分離沉淀孢子,去上層清液。再加入洗脫液(B.2.3.4.2) 40mL,重復(fù)離心操作 3 次。


    用營養(yǎng)鹽培養(yǎng)液稀釋孢子懸液,用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),制成濃度為(1×106±2×105)spores/mL 的霉菌孢子懸液。


    6 種霉菌均用以上方法制成孢子懸液,將 6 種孢子懸液混合在一起,充分振蕩使其均勻分散。


    混合孢子懸液應(yīng)在當(dāng)天使用,若不在當(dāng)天使用應(yīng)在 3°C~7°C 保存,4d 內(nèi)使用。


    4)平板培養(yǎng)基制備


    無菌平皿中注入營養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)基,厚度3mm~6mm,凝固后待用(48h內(nèi)使用)。


    5)霉菌活性控制


    陰性對(duì)照樣品(無菌濾紙)鋪在平板培養(yǎng)基上,用裝有新制備的混合孢子懸液的噴霧器噴孢子懸液,使其充分均勻地噴在培養(yǎng)基和濾紙上。


    在溫度 28°C,相對(duì)濕度大于 90%的條件下培養(yǎng) 7d,濾紙條上應(yīng)明顯有菌生長(zhǎng),否則應(yīng)重新制備孢子懸液。


    6)樣品試驗(yàn)


    同時(shí)空白對(duì)照樣品 A、抗菌塑料樣品 B 也分別鋪在平板培養(yǎng)基(B.3.4)上,噴孢子懸液,使其充分均勻地噴在培養(yǎng)基和樣品上。每個(gè)樣品做 5 個(gè)平行。


    以上樣品在溫度 28°C,相對(duì)濕度大于 90%的條件下培養(yǎng) 28d,若樣品長(zhǎng)霉面積不小于10%,可提前結(jié)束實(shí)驗(yàn)。


    以上試驗(yàn)重復(fù)兩次。


    3、檢驗(yàn)結(jié)果


    取出樣品需立即進(jìn)行觀察,空白對(duì)照樣品 A 長(zhǎng)霉面積應(yīng)不小于 10%,否則不能作為該試驗(yàn)的空白對(duì)照樣品。


    樣品長(zhǎng)霉等級(jí):


    0 級(jí) 不長(zhǎng),即顯微鏡(放大 50 倍)下觀察未見生長(zhǎng);


    1 級(jí) 痕跡生長(zhǎng),即肉眼可見生長(zhǎng),但生長(zhǎng)覆蓋面積小于 10%;


    2 級(jí) 生長(zhǎng)覆蓋面積不小于 10%


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