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    抗生素藥物敏感性試驗簡稱藥敏試驗（或耐藥試驗），旨在了解病原微生物對各種抗生素的敏感性（或耐受程度），以指導臨床合理選用抗菌藥物的微生物學試驗。藥敏試驗目的是使用體外試驗的方法檢測細菌的耐藥性，預測抗菌藥物臨床治療效果并為臨床醫(yī)生針對某一特定感染問題選用藥物提供依據(jù)。

    作為第三方檢測中心，中科檢測機構(gòu)擁有CMA和CNAS認證檢測資質(zhì)，檢測設備齊全，數(shù)據(jù)科學可靠，可出具國家認可的抗生素藥物敏感性試驗報告。

    紙片擴散法

    1、制備接種菌懸液

    a)被測菌株和標準菌株接種于非選擇性培養(yǎng)基如血平皿，置于35℃空氣培養(yǎng)18h~24h。

    b)采用直接菌落法或肉湯增菌法制備:

    1)直接菌落法:選取孵育18h~24h后的菌落形態(tài)一致的且生長較好的3~5個菌落:采用1)接種環(huán)或無菌拭子觸碰每個菌落頂部，轉(zhuǎn)移至含有4mL~5mL,的胰大豆肉湯或無菌生理鹽水中。

    2)肉湯增菌法:將單個菌落接種至肉湯培養(yǎng)基，置于35℃±2℃孵育，至濁度接近規(guī)定的濃度(通常孵育2h~6h)。

    3)采用生理鹽水或肉湯校正菌液濃度至0.5麥氏比濁管，也可用電子比濁儀。

    2、接種平皿

    a)用無菌棉拭子蘸取菌液，在管內(nèi)壁將多余菌液旋轉(zhuǎn)擠去。

    b)在MHA平皿表面均勻涂布3次，每次旋轉(zhuǎn)平皿60°，最后沿平皿內(nèi)瓊脂邊緣涂抹一周。c)校正濃度后的菌液在15min內(nèi)接種完畢。

    3、貼抗菌藥物紙片

    a)接種菌懸液后的MHA平皿置室溫下干燥3min~5min。

    b)用紙片分配器或無菌鑷子將抗菌藥物紙片緊密貼于平皿。各紙片中心相距≥24m。紙片貼上后不應再移動。

    4、 孵育

    貼上紙片15 min內(nèi)，須把平皿倒置放于35 ℃孵箱中孵育16h~18h。對于某些特殊抗菌藥物如苯唑西林或萬古霉素，孵育時間需延長至24h。

    5、結(jié)果判讀

    a)將平皿置于黑色背景下,利用反射光從平皿背面用游標卡尺或直尺測量無明顯細菌生長區(qū)域的直徑(含紙片)，即抑菌圈直徑，取整數(shù)位，單位為mm。

    b)培養(yǎng)基若加入血液，須打開平皿蓋，借助反射光，從正面測量抑菌圈直徑。

    c)測量萬古霉素、利奈唑胺和苯唑西林等的抑菌圈時，使用透射光。

    d)測量甲氧芐啶和磺胺類藥物的抑菌圈時，可忽視輕微生長(20%或較少菌苔生長)而測量較明顯抑制的邊緣。

    梯度擴散法

    梯度擴散法是一種結(jié)合稀釋法和紙片擴散法原理對抗菌藥物敏感性直接定量的藥敏試驗方法。操作步驟如下：

    1、待測細菌的菌懸液配制和接種方法同紙片擴散法。

    2、待平皿干燥后，用鑷子將梯度擴散法條有MIC刻度面朝上，貼在已接種被測菌株的平皿表面,梯度擴散法條全長與瓊脂表面緊密接觸，試條貼好后不應移動。

    3、置于35 ℃±2 ℃孵箱中孵育 16 h~18 h。

    4、結(jié)果判讀

    讀取橢圓形抑菌圈與梯度擴散法條交界點的讀值，即為待測抗菌藥物的MIC值。

    自動化儀器法

    0.5麥氏濁度單位菌懸液的配制方法同紙片擴散法，按照各儀器說明書對菌液進行稀釋。不同種屬細菌稀釋后的菌懸液，加入對應的商品化試驗板條，上機進行檢測。