化妝品抗衰老功效評價方法:體外評價方法和人體評價方法分析

207次 2024.09.29

    化妝品皮膚衰老可以通過抗氧化、抗糖化、抗細胞外基質降解、抗羰基化等不同機理和方向出發。目前常用的抗衰化妝品功效評價方法有生化法、細胞法、3D皮膚模型法、離體皮膚方法以及人體法。





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    體外評價方法


    抗氧化實驗


    自由基是人體代謝過程中產生的一種垃圾毒素,皮膚的衰老與自由基有關,抑制自由基的產生從一定程度上可抑制細胞的衰老。抗氧化實驗一般測試產品吸光度,判斷活性氧和自由基的含量,評價產品清除自由基或活性氧的效果。


    炎癥因子、炎癥介質抑制實驗


    紫外線、生物和化學因素均可誘導產生炎癥因子或炎癥介質,導致蛋白質、脂質與糖類發生非酶糖基化反應,生成脂褐素等無法代謝的產物,同時可刺激黑色素細胞產生黑色素,引起色素的沉積,存留于皮膚中,引發老年斑。可通過酶聯免疫吸附試驗、蛋白質免疫印跡等方法測試產品對炎癥因子、炎癥介質的抑制效果,評價其延緩皮膚衰老功效。


    基質金屬蛋白酶-1活性(MMP-1)抑制實驗


    MMP-1又稱膠原酶-1,是導致皮膚出現皺縮、細紋等衰老癥狀的最主要的酶。采用分光光度法檢測產品對基質金屬蛋白酶活性的抑制情況,可以評價其抗衰老功效。


    細胞表達膠原蛋白實驗


    皮膚中膠原蛋白的流失,會造成皮膚松弛、彈性下降、細紋增多且不斷加深,呈現衰老跡象。人體皮膚中的膠原蛋白主要為Ⅰ型和Ⅲ型。其中,Ⅰ型膠原蛋白約占70%,Ⅲ型膠原蛋白占30%。皮膚出現老化時,膠原蛋白含量逐漸降低,兩者比例發生倒置,同時膠原變粗,出現異常交聯。可采用免疫細胞化學法等方法,對引起Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白及其他相關蛋白、基因、酶改變的標記物進行測試,評價產品抗衰老功效。


    線粒體膜電位實驗


    線粒體膜電位的變化與細胞凋亡密切相關。通過測試線粒體膜電位的提升情況,可以評價皮膚的衰老狀況,間接評價產品的抗衰老功效。


    細胞凋亡實驗


    皮膚的細胞凋亡是正常的生理現象,隨著年齡的增長,真皮中的成纖維細胞會逐漸凋亡。此外,UVA照射會引起細胞損傷,造成皮膚光老化。通過紫外光照射體外培養的成纖維細胞來誘導細胞凋亡,同時加入抗氧化物質,用顯微鏡觀察細胞是否出現解體、排列紊亂、脫顆粒等現象,可分析細胞的凋亡率。此外,還可結合抗炎測試,綜合評價抗氧化物質對抑制細胞凋亡的作用,反映產品的抗衰老功效。


    人體評價方法


    抗皺測試


    臉部不同部位的皺紋出現時間不同,其中眼角的皺紋出現最早,是評估皮膚老化的關鍵點。目前,評價皺紋較精準的儀器包括皮膚光學快速成像系統、皮膚快速三維成像系統,采用基于條紋投影測量技術的3D測量方法,快速獲得皮膚表面形態信息,并轉化為三維圖像,從而獲得皮膚皺紋、皮膚粗糙度的指標數據。此外,還可采用圖像成像系統獲取面部圖像,然后用圖像分析軟件提取眼角區域的皺紋,分析皺紋的長度、深度和面積等。


    皮膚緊致測試


    彈性纖維被破壞、皮膚彈性減弱,會導致皮膚緊致度下降,出現皮膚下垂。因此,可根據皮膚彈性和下垂度變化評價產品的緊致功效。皮膚下垂度主要通過對面部正面和仰臥位的主觀評估判斷。


    皮膚彈性測試


    皮膚彈性是衡量皮膚衰老程度的重要指標。皮膚彈性主要由皮膚膠原纖維、彈力纖維的數量和排列關系決定。隨著年齡的增加,皮膚中可溶性膠原纖維減少,不溶性膠原纖維增加,皮膚的伸展度隨之減少,皮膚彈性降低。使用特定儀器測試皮膚彈性,可以評價產品延緩衰老的功效。


    皮膚水分含量測試


    真皮層水分含量流失,會導致角質層因為缺水而產生細紋。健康皮膚角質層的含水量為10%~30%,角質層含水量低于10%時,皮膚就會變得干燥、粗糙,容易產生細紋。測試使用產品前后皮膚水分含量的變化,可間接評價產品抗衰老功效。現在常用的測試皮膚水分含量的儀器有共聚焦拉曼光譜儀等。


    皮膚顏色測試


    皮膚老化后,膚色會泛黃發暗,出現老年斑。紫外線的照射會促使黑色素細胞分泌黑色素,在自由基和炎癥反應的作用下產生曬斑,呈現色素沉著。同時,還原性糖與蛋白質的結合物高級糖基化終末產物(AGEs),為棕色或黑色的大分子物質,出現在真皮和表皮。隨著年齡的增長,人體皮膚會出現AGEs沉積,導致皮膚發黃,產生褐斑、老年斑。因此,評估皮膚顏色的變化,可以間接評價產品的抗衰老功效。


    皮膚微循環測試


    皮膚微循環系統是個復雜的系統,也是皮膚的重要結構。作為皮膚屏障的重要組成部分,皮膚微循環系統起著儲存血液和營養皮膚的重要作用。皮膚血流量是評價皮膚微循環情況的重要標準。研究表明,年輕人皮膚血管排列整齊,年齡較大者血管擴張、扭曲、排列不規則。總體上,隨著年齡的增長,皮膚血流量增加,但由于皮膚微循環還受其他因素影響,所以在評價化妝品原料或產品的抗衰老功效時,一般只作為輔助指標。常用的測試儀器為激光多普勒成像儀。該儀器利用激光多普勒原理,檢測人體組織微循環。


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