化妝品微生物檢測基本流程介紹:檢測方法及檢測標準

887次 2024.09.24

    從配料、生產、罐裝、分裝等環節,微生物管控成為了化妝品生產的基本盤,是化妝品是否合格的重要標準。一旦微生物“超限”,化妝品將直接危及消費者的健康和安全。



    中科檢測是專業的化妝品安全檢測中心,經國家藥品監督管理部門確認可承擔化妝品注冊和備案檢驗等工作,可提供化妝品微生物檢測、化妝品安全性評價、化妝品安全檢測等化妝品安全相關服務。


    化妝品微生物檢驗項目


    菌落總數:


    化妝品檢樣經過處理,在一定條件下培養后(如培養基成分、培養溫度、培養時間、pH值、需氧性質等),1g (1mL)檢樣中所含菌落的總數。所得結果只包括一群本方法規定的條件下生長的嗜中性的需氧性和兼性厭氧菌落總數。


    霉菌和酵母菌總數:


    化妝品檢樣在一定條件下培養后,1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌數量,以判明化妝品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般衛生狀況。


    3、耐熱大腸菌群:—群需氧及兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌,在44.5培養24h—48h能發酵乳糖產酸并產氣。


    4、金黃色葡萄球菌:革蘭氏陽性球菌,呈葡萄狀排列,無芽胞,無莢膜,能分解甘露醇,血漿凝固酶陽性。


    5、銅綠假單胞菌:屬于假單胞菌屬,為革蘭氏陰性桿菌,氧化酶陽性,能產生綠膿菌素。


    此外還能液化明膠,還原硝酸鹽為亞硝酸鹽,在特定條件下能生長。


    化妝品微生物檢驗標準


    《化妝品衛生規范》2007版中規定,眼部化妝品、口唇等黏膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品中,菌落總數要<500cfu/ml(g)其他化妝品菌落總數要<1000 cfu/ml(g);霉菌和酵母菌總數要<100cfu/ml(g)。


    像糞大腸菌群、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等致病菌在1 g或1mL化妝品中是不得檢出的。


    《化妝品生產企業衛生規范》中規定:生產過程中半成品儲存間、灌裝間、清潔容器儲存間和更衣室空氣中細菌菌落總數應1000 cfu/立方米;灌裝間工作臺表面細菌菌落總數應20 cfu/平方米,工人手表面細菌菌落總數應300 cfu/只手,并不得檢出致病菌。


    化妝品微生物檢驗流程按照《化妝品安全技術規范》2015版第五章微生物檢驗方法對化妝品微生物進行檢驗工作。


    微生物檢驗方法


    總則


    1范圍本部分規定了化妝品微生物學檢驗的基本要求。本部分適用于化妝品樣品的采集、保存及供檢樣品制備。


    2儀器和設備


    2.1天平:0~200g,精確至0.1g。


    2.2高壓滅菌器。


    2.3振蕩器。


    2.4三角瓶:250mL、150mL。


    2.5玻璃珠。


    2.6玻璃棒。


    2.7滅菌刻度吸管:10mL、1mL。


    2.8恒溫水浴箱。


    2.9均質器或研缽。


    2.10滅菌均質袋。


    3培養基和試劑


    3.1生理鹽水成分:氯化鈉8.5g蒸餾水加至1000mL制法:溶解后,分裝到加玻璃珠的三角瓶內,每瓶90mL,121高壓滅菌20min。


    3.2 SCDLP 液體培養基成分:酪蛋白胨17g大豆蛋白胨3g氯化鈉5g磷酸氫二鉀2.5g葡萄糖2.5g卵磷脂1g吐溫807g蒸餾水1000mL制法:先將卵磷脂在少量蒸餾水中加熱溶解后,再與其他成分混合,加熱溶解,調 pH為7.2~7.3分裝,每瓶90mL,121高壓滅菌20min。注意振蕩,使沉淀于底層的吐溫80充分混合,冷卻至25左右使用。


    注:如無酪蛋白胨和大豆蛋白胨,也可用多胨代替。


    3.3滅菌液體石蠟。制法:取液體石蠟50mL,121高壓滅菌20min。


    3.4滅菌吐溫80。制法:取吐溫8050mL,121高壓滅菌20min。


    4樣品的采集及注意事項


    4.1所采集的樣品,應具有代表性,一般視每批化妝品規格大小,隨機抽取相應數量的包裝單位。檢驗時,應從不少于2個包裝單位的樣品中共取10g 或10mL。包裝量小于20g 的樣品,采樣時可適當增加樣品包裝數量。


    4.2供檢樣品,應嚴格保持原有的包裝狀態。容器不應有破裂,在檢驗前不得打開,防止樣品被污染。


    4.3接到樣品后,應立即登記,編寫檢驗序號,并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗,樣品應置于室溫陰涼干燥處,不要冷藏或冷凍。


    4.4若只有一個樣品而同時需做多種分析,如微生物、毒理、化學等,則宜先取出部分樣品做微生物檢驗,再將剩余樣品做其他分析。


    4.5在檢驗過程中,從打開包裝到全部檢驗操作結束,均須防止微生物的再污染和擴散,所用器皿及材料均應事先滅菌,全部操作應在符合生物安全要求的實驗室中進行。


    5供檢樣品的制備


    5.1液體樣品


    5.1.1水溶性的液體樣品:用滅菌吸管吸取10mL 樣品加到90mL 滅菌生理鹽水中,混勻后,制成1:10檢液。


    5.1.2油性液體樣品:取樣品10g,先加5mL 滅菌液體石蠟混勻,再加10mL 滅菌的吐溫80,在40~44水浴中振蕩混合10min,加入滅菌的生理鹽水75mL(在40~44水浴中預溫),在40~44水浴中乳化,制成1:10的懸液。


    5.2膏、霜、乳劑半固體狀樣品


    5.2.1親水性的樣品:稱取10g,加到裝有玻璃珠及90mL 滅菌生理鹽水的三角瓶中,充分振蕩混勻,靜置15min。用其上清液作為1:10的檢液。


    5.2.2疏水性樣品:稱取10g,置于滅菌的研缽中,加10mL 滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀,再加入10mL 滅菌吐溫80,研磨待溶解后,加70mL 滅菌生理鹽水,在40~44水浴中充分混合,制成1:10檢液。


    5.3固體樣品稱取10g,加到90mL 滅菌生理鹽水中,充分振蕩混勻,使其分散混懸,靜置后,取上清液作為1:10的檢液。使用均質器時,則采用滅菌均質袋,將上述水溶性膏、霜、粉劑等,稱10g 樣品加入90mL 滅菌生理鹽水,均質1min~2min;疏水性膏、霜及眉筆、口紅等,稱10g 樣品,加10mL滅菌液體石蠟,10mL 吐溫80,70mL 滅菌生理鹽水,均質3min~5min。


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