化妝品美白功效評價方法:體外測試方法和人體評價方法盤點

737次 2024.10.10

    目前,國內(nèi)外對化妝品美白功效沒有統(tǒng)一的評價標準,通常可根據(jù)產(chǎn)品的美白機制和作用途徑,選擇不同的評價方法,從圖像、相關指標數(shù)據(jù)、志愿者或?qū)<抑饔^評估等方面,對產(chǎn)品的美白功效進行評價。





    中科檢測是專業(yè)的化妝品檢測與功效評價中心,經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理部門確認可承擔化妝品注冊和備案檢驗等工作,可提供化妝美白功效評價、化妝品安全性評價、化妝品安全檢測等化妝品安全相關服務。


    體外測試方法


    酪氨酸酶活性抑制實驗


    人體膚色的差異主要取決于黑色素的含量及分布。酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶,其活性決定黑色素形成的數(shù)量。化妝品對酪氨酸酶活性抑制作用的強弱,可作為評價產(chǎn)品美白功效的參考指標。


    該實驗利用從蘑菇中提取的酪氨酸酶,以L-酪氨酸或L-多巴為底物,加入受試物、酪氨酸酶等進行反應,然后測量其吸光值,計算得到酪氨酸酶抑制率,評估受試物對酪氨酸酶活性的抑制作用,評價其美白功效。


    抗氧化實驗


    紫外線、體內(nèi)代謝等因素會促使機體產(chǎn)生自由基。自由基可直接或間接調(diào)控酪氨酸酶的表達,加速皮膚黑色素的產(chǎn)生。抑制自由基的產(chǎn)生從一定程度上可抑制黑色素的產(chǎn)生,因此,可通過測試樣品對自由基的抑制率,評價其美白功效。


    黑色素細胞中的黑色素含量測定實驗


    黑色素細胞是機體形成、分泌黑色素的細胞,通過細胞生物學法測定黑色素細胞中的黑色素含量,是檢測化妝品美白功效的有效方法。


    該實驗多通過在體外培養(yǎng)特定的黑色素瘤細胞模型,采用分光光度法、圖像分析技術等,測試細胞內(nèi)酪氨酸酶活性及黑色素含量,對受試物的美白功效進行評價。為更好模擬人皮膚中黑色素細胞的生長、黑色素的分泌,現(xiàn)在還常常采用黑色素瘤細胞與角質(zhì)形成細胞共培養(yǎng)模型。


    角質(zhì)形成細胞黑色素攝取實驗


    黑色素生成后,需要轉(zhuǎn)移才能到達表皮層,因此,可以通過測試受試物抑制黑色素小體轉(zhuǎn)移的情況,評價其美白功效。


    該實驗先在正常人表皮角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)基中加入受試物,然后加入帶有熒光劑的黑色素顆粒,孵化4小時后,測量培養(yǎng)基中剩余熒光劑的劑量,考察受試物對黑色素小體轉(zhuǎn)移的抑制效果。


    非酶糖基化抑制實驗


    皮膚變黃和出現(xiàn)色斑的主要原因是脂質(zhì)過氧化和非酶糖基化反應。其中,生物體內(nèi)的非酶糖基化反應可生成高級糖基化終產(chǎn)物(AGEs)。AGEs為棕色或黑色的大分子物質(zhì),導致皮膚發(fā)黃、產(chǎn)生褐斑。


    該實驗通過在體外模擬體內(nèi)蛋白質(zhì)非酶糖基化的過程,測試受試物抑制AGEs生成的能力,評價其美白功效。


    重組皮膚模型替代法


    三維重組皮膚模型是利用組織工程技術,將人的皮膚細胞(含黑色素細胞)在培養(yǎng)皿中培養(yǎng),構(gòu)建具有三維結(jié)構(gòu)的人工皮膚組織模型。


    該方法在三維重組皮膚模型上涂抹受試物后,測定模型組織的酪氨酸酶活性、黑色素含量及相關酶的表達,表征受試物對黑色素的抑制作用。


    人體評價方法


    皮膚顏色測試


    該方法利用儀器采集受試者使用化妝品前后的皮膚狀態(tài)參數(shù),并以數(shù)據(jù)或圖片的形式呈現(xiàn),可最大程度消除人為因素影響。目前,常用來評價皮膚顏色的探頭式儀器有Skin-col or imeter CL400和Chromameter CR-400。這兩種探頭式儀器均應用反射分光光度法,通過檢測皮膚表層結(jié)構(gòu)上的紫外可見反射光,采用三維顏色空間分量的定量,模擬并還原描述人肉眼看到的物體顏色,經(jīng)過計算,綜合評價皮膚色度。


    皮膚紅黑色素測試


    人類皮膚的顏色主要取決于人體皮膚中黑色素和血紅素的含量。Mexameter Mx18是常用的測定皮膚色度的儀器,其結(jié)果輸出以黑色素指數(shù)和紅斑指數(shù)表示,黑色素指數(shù)越高,說明皮膚中所含的黑色素越多。


    皮膚黑色素含量測試


    該測試是一種客觀的分析方法,使用光密度測量法,量化角質(zhì)層中黑色素的含量。測試時,使用透明膠帶將受試者的皮膚角質(zhì)層剝離,用Fot ana-Masson銀給剝離的樣品染色,然后將樣品置于配有內(nèi)部光密度計的顯微鏡下,測定樣品的光透射率,并以220放大倍率拍攝。使用0~10級的灰度判別來評估顏色的密度,再通過計算,測定角質(zhì)層細胞中的黑色素含量。


    皮膚光澤度測試


    光澤度是構(gòu)成物質(zhì)表面視覺特征的重要參數(shù)之一。皮膚光澤度直接關系到光線進入人眼時的視覺效果,所以測試使用化妝品前后的皮膚光澤度,在一定程度上可以評價產(chǎn)品的美白效果。目前,評價皮膚光澤度的儀器主要有Skin-Gl ossymet er GL200和GonioLux4D。


    VISIA拍照


    用VI SIA拍照,通過分析圖像可以評價化妝品的美白功效。常用的儀器設備有Visia和Vi sia-CR。對美白功效的評價,可選用標準光、UV光和交叉偏振光采集面部圖像,并使用圖像分析軟件進行量化分析,以評估使用受試物前后皮膚顏色的變化。


    主觀評價法


    主觀評價法包括專家評估和志愿者自我評估兩種方法。專家評估由經(jīng)驗豐富的專家,對志愿者使用受試物前后皮膚顏色的變化進行評分,評價受試物的美白效果。志愿者自我評估多采用調(diào)查問卷形式,由志愿者對使用受試物后膚色的改善情況進行評估。在實際操作中,主觀評價法多與其他方法結(jié)合使用,以便更客觀準確地評價化妝品的美白功效。


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